Darwiniana, nueva serie vol. 1-1

INTRODUCCIÓN

El género Hymenasplenium Hayata comprende alrededor de 20 especies neo- y paleotropicales, que se caracterizan por sus rizomas rastreros con sistema vascular dorsiventral, bases de los pecíolos ensanchadas y número cromosómico x = 38-39, a diferencia de las especies de Asplenium L. que típicamente poseen estelas de simetría radial, las bases de los pecíolos no ensanchadas y número cromosómico x = 36 (Murakami & Moran, 1993; Christenhusz et al., 2011).
Hymenasplenium se distribuye en África tropical, sudeste de Asia, Japón, Polinesia, norte de Hawaii, Antillas, América Central y del Sur, donde halla el límite austral de su distribución en la República Argentina.
Los antecedentes de filogenias moleculares muestran que Hymenasplenium es un grupo monofilético distinto al resto de los Asplenium (Murakami & Schaal, 1994; Murakami, 1995; Murakami et al., 1999; Gastony & Johnson, 2001; Schneider et al., 2004). Esto llevó a los autores a reconocer a Hymenasplenium como un género, aunque no se publicaron las nuevas combinaciones de los nombres de las especies.
Schneider et al. (2004) consideraron como sinapomorfias del género Asplenium al número cromosómico x = 36 o menor (en Hymenasplenium: x = 38 y x = 39) y a la presencia de esclereidas tipo “Asplenium” en la corteza interna de la raíz (ausentes en Hymenasplenium). Estos autores señalaron, además, que no se han encontrado híbridos entre especies de Hymenasplenium y de Asplenium, aunque los híbridos son habituales en las Aspleniaceae.
Hymenasplenium se reconoce como género en trabajos recientes, como por ejemplo en la clasificación de helechos y licofitas de Christenhusz et al. (2011), y en la revisión de las especies de Hymenasplenium de Cuba de Regalado & Prada (2011), donde además actualizaron la nomenclatura de los taxones neotropicales de este género.
El objetivo de esta contribución es revisar el género Hymenasplenium en la Argentina dentro del marco de la actual definición de los géneros y del estudio sistemático de los taxones de Aspleniaceae que habitan en este país, aportando información sobre su taxonomía y distribución geográfica, así como sobre los caracteres morfológicos y palinológicos que los distinguen.

MATERIALES Y MÉTODOS

El trabajo se realizó con material de herbario depositado en los siguientes herbarios CORD, JUA, LIL, LP y SI (Thiers, 2013).
Para el análisis de las raíces y los pecíolos, el material fue tratado con hidróxido de Na al 5%. Los cortes se realizaron a mano alzada y con crió-tomo y se colorearon con safranina al 1% en alcohol etílico 96⁰. Las muestras se observaron con una lupa binocular estereoscópica Nikon SMZ 1000 y con un microscopio Nikon Labophot-2.
Las esporas se analizaron con microscopios óptico y electrónico de barrido (MEB) sin tratamiento químico previo. Para el estudio con MEB, el material fue metalizado con oro-paladio. Las observaciones se realizaron en un microscopio JEOL JSMT-100.
Se calcularon las siguientes medidas promedio de 20 esporas por ejemplar: diámetro ecuatorial y polar (incluyendo perisporio), espesor de exosporio y perisporio y dimensiones de elementos ornamentales (espinas).
Las descripciones comprenden sólo las características diagnósticas de los taxones, citándose las referencias bibliográficas para las descripciones completas.

TRATAMIENTO TAXONÓMICO

Hymenasplenium Hayata, Bot. Mag. (Tokyo) 41: 712. 1927. Asplenium sect. Hymenasplenium (Hayata) K. Iwats., Acta Phytotax. Geobot. 27: 44. 1975. ESPECIE TIPO: Hymenasplenium unilaterale (Lam.) Hayata (= Asplenium unilaterale Lam.).

Plantas terrestres, epífitas o saxícolas. Rizomas rastreros con sistema vascular dorsiventral. Raíces con células parenquimáticas regularmente engrosadas. Pecíolos verdosos o castaños, con base ensanchada. Láminas generalmente 1-pinnadas, raquis redondeado o algo acanalado, con o sin alas. Venas generalmente libres. Soros dispuestos de a pares a ambos lados de la vena principal, cubiertos de indusios alargados. Esporas monoletes con perisporio plegado, espinoso o papiloso. Número cromosómico x = 38 - 39.

Clave para la identificación de las especies que crecen en Argentina

1. Láminas con ápice pinnatífido no conforme, largamente atenuado. Pecíolos de sección circular, acanalados. Pinnas con aurícula basal acroscópica poco evidente, margen dentado o crenado-dentado y venas 1-furcadas. Esporas plegado aladas	H. laetum
1. Láminas con pinna apical subconforme. Pecíolos de sección triangular alados. Pinnas con aurícula basal acroscópica evidente, margen irregularmente crenado y venas 1-3-furcadas. Esporas espinosas	H. triquetrum

Hymenasplenium laetum (Sw.) L. Regalado & Prada, Amer. Fern J. 101: 278. 2011. Asplenium laetum Sw., Syn. Fil. 79: 271. 1806. TIPO: Schkuhr, 24 K1. Linn. Pfl.-Syst. 1: 65, t. 70. 1809 (neotipo designado por Proctor, Ferns of Jamaica 371. 1985).

Iconografía. Murakami & Moran, 1993: 15, Fig. 8A.

Referencias. Para descripción de la especie y sinónimos completos véase: Murakami & Moran, 1993: 14; Regalado & Prada, 2011: 270.

Plantas terrestres. Rizomas cortamente rastreros con escamas basifijas, 3 x 0,3 mm, lanceoladas, de margen entero y clatradas. Relación pecíolo : lámina 1 : 2. Pecíolos castaño oscuros o verdosos, acanalados. Láminas de 15-40 cm, pinnadas, herbáceas, triangular-lanceoladas, con ápice atenuado y 10-20 pares de pinnas. Raquis con alas verdosas. Pinnas de 3-6 x 0,5-1,5 cm, patentes al raquis, margen dentado o crenado-dentado, ápice agudo o subobtuso, sésiles, con base cuneado-asimétrica, aurícula acroscópica poco evidente y venas 1-furcadas, con hidatodos. Soros alargados, 4-6 pares por pinna, cubiertos por indusios rectangulares, de 2-6 mm y margen entero. Esporas plegado-aladas.

Distribución y hábitat. México, América tropical continental, Antillas Mayores y Menores, Trinidad y Tobago, África tropical y Madagascar. En Argentina crece en las provincias de Misiones, Salta y Tucumán, habita en lugares sombríos y húmedos, bordes de arroyos y laderas de cerros, entre los 150 y 1400 m s.m. ( Fig. 1 Fig. 1. Mapa de distribución de Hymenasplenium laetum e H. triquetrum en Argentina. ).

Material representativo examinado

ARGENTINA. Misiones. Depto. Candelaria, Campo San Juan, 20-IV-1996, Guillén 472 (LP). Depto. Guaraní, predio Guaraní, 20-IX-1995, Tressens et al. 5418 (LP). Depto. Iguazú, PN Iguazú, Salto Arechea, 2-XII-1993, Vanni et al. 13145 (LP). Salta. Depto. Orán, Río Pescado, Abra Arasayal, 26-X-1970, Vervoorst & Cuezzo 7598c (LIL). Tucumán. Depto. Tafí del Valle, Yerba Buena, 700 m s.m., 02-1919, Venturi 254 (SI); Cuesta de San Ignacio, VII-1912, Castillón 55 (SI); Cuesta de San Javier, 16-V-1917, Osten 10481 (SI)

Hymenasplenium triquetrum (N. Murak. & R. C. Moran) L. Regalado & Prada, Amer. Fern J. 101: 279. 2011. Asplenium triquetrum N. Murak. & R. C. Moran, Ann. Missouri Bot. Gard. 80: 31, fig. 8 b, c. 1993. TIPO: Bolivia. La Paz, Prov. Nor-Yungas, “Polo-Polo bei Coroico, Im tiefen Schatten des Hochwaldes oder auf nassem Boden”, 1100 m, 10-XI-1912, O. Buchtien 625 (holotipo MO, isotipos BM 000937818!, K, NY 00149307!, US 00406302!, Z).

Iconografía. Murakami & Moran, 1993: 15, Figs. 8B y C.

Referencias. Para descripción de la especie y sinónimos completos véase: Murakami & Moran, 1993: 31.

Plantas saxícolas. Rizomas cortamente rastreros con escamas basifijas, de 1 x 1,5 mm, lanceoladas, de margen entero y clatradas. Relación pecíolo : lámina 1 : 3 - 1 : 2. Pecíolos castaños o verdosos, profundamente acanalados y alados. Láminas de 20-40 cm, pinnadas, subtriangular-lanceoladas, con pinna apical subconforme y 12 a 15 pares de pinnas. Raquis con alas verdosas. Pinnas distantes, patentes, de 5-9 x 1,2-1,7 cm, muchas sésiles, de ápice agudo, base cuneado-asimétrica, con aurícula basal acroscópica claramente diferenciada, margen irregularmente crenado y venas 1-3-furcadas, con hidatodos. Soros alargados, 5-8 pares por pinna, cubiertos por indusios rectangulares, de 5-9 mm y margen entero. Esporas espinosas.

Distribución y hábitat. Bolivia y Brasil. En Argentina crece en la provincia de Misiones, en lugares húmedos, sobre piedras, en cursos de agua y cascadas, entre los 150-800 m s.m. ( Fig. 1 Fig. 1. Mapa de distribución de Hymenasplenium laetum e H. triquetrum en Argentina. ).

Material representativo examinado

ARGENTINA. Misiones. Depto. Cainguás, Reserva Arroyo Cuña Pirú, UNLP, 13-I-2005, Marquez & Biganzoli 65 (SI). Depto. Gral. Manuel Belgrano, Bernardo de Irigoyen, debajo de un salto muy húmedo, adherido a rocas, 800 m s.m., 29-VIII-1950, Diem 1513 (SI).

Análisis morfológico y palinológico

Las raíces presentan, en un corte transversal, una rizodermis uniestratificada, corteza parenquimática, endodermis con paredes celulares radiales y pared tangencial interna engrosadas y actinostela diarca. En general, se diferencia una corteza externa y una interna. En H. laetum la corteza interna está compuesta por 9-10 capas de células parenquimáticas con paredes algo engrosadas y abundantes contenidos, no identificados ( Fig. 2A-B ) y en H. triquetrum por 4-5 capas de células con paredes fuertemente engrosadas y oscurecidas ( Fig. 2C-D ).
Los pecíolos en H. laetum son subcirculares en sección transversal, acanalados con breves rebordes laterales y líneas de aireación en la base de esos rebordes. En corte transversal se observan en posición subepidérmica 4-5 estratos de células parenquimáticas engrosadas y células endodérmicas con paredes radiales y tangenciales internas engrosadas ( Fig. 2E-G ).
En H. triquetrum los pecíolos son triangulares en sección transversal, alados, con las líneas de aireación ubicadas en la base de las alas. Se observan 3-4 hileras de tejido subepidérmico parenquimático engrosado y células endodérmicas con paredes radiales engrosadas ( Fig. 2H-I ).
Las esporas son monoletes en ambas especies, en H. laetum son plegado-aladas ( Fig. 3A-D ) en tanto que las de H. triquetrum son espinosas ( Fig. 3E-G ).
En H. laetum se observan en superficie numerosos pliegues alados de margen equinado, parcialmente fusionados, con abundantes perforaciones y espínulas entre pliegues. El pliegue supralesural es evidente. El diámetro ecuatorial es de 40-50 μm y el diámetro polar de 32-38 μm. El exosporio tiene un espesor ca. 2 μm y el perisporio de 0,5-1 μm.
En H. triquetrum la ornamentación está compuesta por espinas solitarias, distribuidas en toda la superficie de la espora, de 8-12 μm y bases huecas. El diámetro ecuatorial es de 35-45 μm y el diámetro polar de 20-25 μm. El exosporio tiene un espesor ca. 2 μm y el perisporio de 0,5-1 μm.

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

Para la Argentina se reconocen dos especies de Hymenasplenium: H. laetum e H. triquetrum. Si se tiene en cuenta la distribución general de Hymenasplenium, las especies aquí tratadas alcanzan la distribución más austral del género, observándose en el caso de H. laetum una distribución disyunta en el noroeste y noreste argentino, mientras que H. triquetrum habita solo en el noreste (provincia de Misiones). Si bien Regalado & Prada (2011) no mencionaron estas especies para Argentina, Murakami & Moran (1993) citaron ejemplares de referencia de H. laetum de la provincia de Salta y de H. triquetrum de la provincia de Misiones.
Hymenasplenium triquetrum tiene una distribución restringida a Bolivia, sur de Brasil y Argentina, a diferencia de H. laetum que es la especie de Hymenasplenium más común y más ampliamente distribuida en América.
En referencia a la estructura de las raíces, se corrobora aquí el valor diagnóstico de las características de la corteza interna para diferenciar los dos géneros de Aspleniaceae. En Hymenasplenium se distingue un número variable de capas de células parenquimáticas con paredes regularmente engrosadas, mientras que en las raíces de Asplenium (Schneider, 1997) se observan de 1-3 capas de esclereidas tipo “Asplenium”. Leroux et al. (2011) observaron que las paredes de las células corticales de las raíces de las Aspleniaceae no están lignficadas y que la coloración oscura en algunas zonas de la corteza es producida por sustancias impregnantes aún no identificadas.
El análisis de las esporas pone de manifiesto que en el género Hymenasplenium se encuentran dos de los tipos de ornamentación reconocidos para las Aspleniaceae. La ornamentación espinosa es característica de un grupo de especies de Hymenasplenium, denominado por Murakami & Moran (1993) como “grupo repandulum” mientras que la ornamentación plegado-alada se encuentra tanto en el género Hymenasplenium como Asplenium.
En referencia a los datos aportados por Guillén & Daviña (2005) sobre el número cromosómico x = 36 en especies de Hymenasplenium, se ha encontrado aquí un error de determinación en los ejemplares analizados por estos autores. Así, el ejemplar Guillén 473 (SI), no corresponde a H. triquetrum sino a Asplenium pulchellum Raddi. El otro ejemplar (Guillén 472) citado por estos autores, no se ha podido ubicar en los herbarios consultados, pero dada la similitud de la localidad de colección, fecha y número de colección, se supone hasta tanto pueda ser corroborado, que se trataría de la misma especie que el ejemplar Guillén 473. Por lo expuesto se puede considerar que hasta el momento el número cromosómico básico registrado para Hymenasplenium es x = 38 o x = 39.
Si bien el contorno de los pecíolos y el desarrollo de las alas, son características variables dentro del género Hmenasplenium, permiten diferenciar las especies aquí estudiadas.
Las láminas de H. laetum se distinguen por sus ápices extremadamente atenuados, observándose según otros autores cierta variabilidad en cuanto al tamaño de las pinnas, sus contornos y márgenes (Murakami & Moran, 1993; Regalado & Prada, 2011). Según estos autores los híbridos entre H. laetum y H. delitescens (Maxon) L. D. Gómez, tienen características intermedias en las pinnas. En el material analizado en el presente estudio no se han identificado ejemplares con caracteres de posibles híbridos.
Los datos morfo-anatómicos y palinológicos aquí presentados constituyen un aporte a la sistemática de las Aspleniaceae y junto a los datos moleculares corroboran la delimitación de los dos géneros de esta familia de helechos.

AGRADECIMIENTOS

Este trabajo se realizó en el marco de los proyectos de ANPCyT (PICT 0661) y UNLP (N610).